جداسازی و بررسی مولکولی باکتری های بیولومینسانس در دریای مازندران

علاقه مندی زیادی در استفاده از بیولومینسانس، از زمان های دور، وجود داشته است. امروزه نیز این پدیده به دلیل کاربردهای بسیار در بیوتکنولوژی، پزشکی و صنایع غذایی به عنوان گزارشگر بیان ژن و بیوسنسورها، توجه شده است. بیولومینسانس عبارت است از تولید نور به وسیله یک ارگانیسم زنده، که به دلیل اکسیداسیون یک سوبسترا نظیر لوسیفرین توسط آنزیم لوسیفراز رخ می دهد. باکتری های نورافشان، فراوانترین ارگانیسم های بیولومینسانت هستند که اغلب در زیستگاه های دریایی یافت می شوند. تاکنون باکتری های نورافشان از مناطق دریایی سرتاسر جهان، ، جداسازی و شناسایی شده اند. در این پژوهش، نمونه های آب دریا از ایستگاه های متعدد سواحل جنوبی دریای مازندران، جمع آوری شد. باکتری های نورافشان با استفاده از محیط های کشت اختصاصی swb و swa جداسازی شد و ویژگی های مورفولوژیکی و فیزیولوژیکی آن ها تعیین گردید. پس از گروه بندی جنس های مختلف باکتری های نورافشان بر اساس توالی ژن luxa، پرایمر های اختصاصی luxa طراحی و سنتز شد. با استخراج نوکلئیک اسید باکتری ها، واکنش زنجیره ای پلیمراز ژن luxa و 16s rdna، انجام شد. توالی ژن 16s rdna سویه های باکتری تعیین شد و درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار های بیوانفورماتیک، رسم شد. تعداد 22 سویه ی باکتریایی نورافشان از آب دریای مازندران جداسازی شد که با آزمون های بیوشیمیایی، جنس ها متعلق به ویبریو، فوتوباکتریوم و آلی ویبریو بودند. همچنین واکنش زنجیره ای پلیمراز ژن luxa در باکتری های جدا شده توسط پرایمرهای اختصاصی luxa1، luxa2 و luxa3 انجام شد. نتایج توالی یابی ژن 16s rdna چهار سویه فوتوباکتریوم، همولوژی 99% را با فوتوباکتریوم لیوگناتی، نشان داد. نتایج تعیین جنس بر اساس آزمون های بیوشیمیایی و بررسی مولکولی واکنش زنجیره ای پلیمراز با پرایمر های اختصاصی luxa و نیز نتایج حاصل از توالی یابی ژن 16s rdna، با یکدیگر مطابقت داشت.